ΚΟΙΝΟΠΟΙΗΣΗ | ΕΚΤΥΠΩΣΗ | ΗΛΕΚΤΡΟΝΙΚΗ ΔΙΕΥΘΥΝΣΗ
Θέλω να ξεκινήσω με μια υπενθύμιση που συχνά χάνεται στις δημόσιες συζητήσεις: Τα εμβόλια mRNA κατά της Covid είναι πραγματικά νέα ιατρικά προϊόντα.
Πριν από τις επείγουσες άδειες το 2020, η τεχνολογία εμβολίων mRNA δεν είχε αναπτυχθεί ποτέ σε μεγάλη κλίμακα σε ανθρώπους. Μόνο δύο κλινικές δοκιμές, μία από την Pfizer-BioNTech και μία από την Moderna, είχαν δοκιμάσει ποτέ αυτήν την πλατφόρμα σε ανθρώπους. Συνολικά, περίπου 37,000 άτομα είχαν λάβει ποτέ εμβόλιο mRNA στην ιστορία της ιατρικής (χωρίς να υπολογίζεται η προηγούμενη εμπειρία με εμβόλια λύσσας, CMV και καρκίνου, που περιορίζεται σε πολύ μικρότερες μελέτες πρώιμης φάσης). Αυτό δεν αποτελεί κριτική. είναι απλώς μια δήλωση γεγονότος. Αλλά σημαίνει ότι το μακροπρόθεσμο προφίλ ασφάλειας αυτών των προϊόντων ήταν, και παραμένει, ατελώς κατανοητό.
Αυτό που ακολουθεί είναι οικείο σε σχεδόν όλους τους μοριακούς βιολόγους. Είναι περίπλοκο, αλλά προσπαθώ να το απλοποιήσω δεδομένων των διακυβευμάτων. Είναι σημαντικό να καθοριστεί με σαφήνεια το μοριακό πλαίσιο για όλους, επειδή ο τρόπος παρασκευής αυτών των εμβολίων καθορίζει άμεσα τι υπάρχει μέσα στο φιαλίδιο.. Και ό,τι υπάρχει μέσα στο φιαλίδιο, μόλις εγχυθεί, θα ταξιδέψει σε όλο το σώμα και θα ενεργοποιήσει μια σειρά από γεγονότα που μπορούν να οδηγήσουν σε μακροπρόθεσμες επιπτώσεις στην υγεία.
Η μεταγραφή in vitro δεν είναι απλώς μια λεπτομέρεια κατασκευής
Τα τροποποιημένα εμβόλια mRNA παράγονται χρησιμοποιώντας μια διαδικασία που ονομάζεται μεταγραφή in vitro (IVT))Η ενδοφλέβια μεταφορά (IVT) είναι η μέθοδος που χρησιμοποιείται για τη σύνθεση του τροποποιημένου mRNA που τελικά γίνεται το δραστικό συστατικό του εμβολίου.
Δεν πρόκειται για μια ασήμαντη τεχνική λεπτομέρεια. Η ενδομεταφορά (IVT) διαμορφώνει ουσιαστικά τη μοριακή σύνθεση του τελικού προϊόντος.
Οι επιστήμονες της BioNTech, συμπεριλαμβανομένων εκείνων που εμπλέκονται άμεσα στην ανάπτυξη του εμβολίου της Pfizer, δημοσίευσαν μια λεπτομερή ανασκόπηση.1 περιγράφοντας πώς οι αντιδράσεις IVT παράγουν όχι μόνο το επιδιωκόμενο mRNA πλήρους μήκους, αλλά και μια σειρά από υποπροϊόντα και ακαθαρσίες, πώς αυτά συνήθως απομακρύνονται και ποιες μπορεί να είναι οι βιολογικές τους συνέπειες εάν επιμένουν. Αυτές οι οδηγίες παρασκευής μαζί με τα υποπροϊόντα που δημιουργούν περιγράφηκαν επίσης λεπτομερώς από την Moderna στις ευρεσιτεχνίες της (US10,653,712 B2 και US10,077,439 B2). Αλλά το πιο σημαντικό, αυτή η μοριακή βιολογία ήταν καλά εδραιωμένη πολύ πριν από την Covid. Τίποτα από αυτά δεν είναι εικασία.
Το αρχικό υλικό: Πρότυπα DNA
Στον πυρήνα της, μια αντίδραση IVT ξεκινά με δίκλωνο DNA που κωδικοποιεί την επιθυμητή πρωτεΐνη. Σε αυτήν την περίπτωση, την πρωτεΐνη αιχμής του SARS-CoV-2.
Η αλληλουχία κωδικοποίησης ακίδων που χρησιμοποιείται στα εμβόλια mRNA είναι γενετικώς τροποποιημένο για τη βελτίωση της σταθερότητας και της κυτταρικής ανοχής, συμπεριλαμβανομένων δύο υποκαταστάσεων αμινοξέων που το διακρίνουν από την ιική αιχμή. Αυτή η τροποποίηση είναι εκ προθέσεως.
Το ίδιο το πρότυπο DNA μπορεί να λάβει διαφορετικές μορφές. Κατά τη διάρκεια των πρώτων κλινικών δοκιμών της Pfizer, χρησιμοποιήθηκαν θραύσματα DNA που δημιουργήθηκαν με PCR. Ωστόσο, η εμπορική διαδικασία παρασκευής βασιζόταν σε DNA που προέρχεται από πλασμίδια. Αυτό έχει σημασία επειδή τα πλασμίδια περιέχουν πρόσθετες ρυθμιστικές αλληλουχίες. Στην περίπτωση της Pfizer, αυτά περιλαμβάνουν στοιχεία όπως ο υποκινητής SV40 και οι αλληλουχίες ori, τα οποία εγείρουν ανησυχίες σε περίπτωση που εισέλθουν σε ανθρώπινα κύτταρα.
Μόλις αυτό το πρότυπο DNA προστεθεί στην αντίδραση IVT, μαζί με την RNA πολυμεράση και άλλα συστατικά, μεταγράφεται σε mRNA (Σχήμα 1).
Η IVT παράγει υποπροϊόντα μέσω σχεδιασμού
Ενώ η επιθυμητή έξοδος της IVT είναι το επιδιωκόμενο προϊόν mRNA πλήρους μήκους, η πραγματική έξοδος είναι πιο περίπλοκη. Αυτά περιλαμβάνουν διάφορα υποπροϊόντα με τη μορφή (1) διαφόρων ειδών RNA, συμπεριλαμβανομένου του δίκλωνου RNA (dsRNA), (2) DNA συνδεδεμένου με RNA (υβρίδια RNA-DNA) και (3) του ελεύθερου DNA από το αρχικό πρότυπο (Σχήμα 2).
Ο σχηματισμός αυτών των υποπροϊόντων είναι καλά τεκμηριωμένος και αναπόφευκτος και γι' αυτό ο καθαρισμός κατάντη είναι απολύτως απαραίτητος για την ασφάλεια.
Σχήμα 2. Υποπροϊόντα και ρύποι της κατασκευής ενδοεπιθηλιακών φυτών. Εικόνα προσαρμοσμένη από 1.
Ο καθαρισμός έχει γνωστούς περιορισμούς
Μετά την παρασκευή, απαιτούνται δύο βήματα καθαρισμού, πρώτα για την αφαίρεση του DNA και στη συνέχεια για την αφαίρεση των υποπροϊόντων RNA (Σχήμα 3):
Σχήμα 3. Αφαίρεση υποπροϊόντων IVT. Εικόνα προσαρμοσμένη από 2.
Για την απομάκρυνση του DNA, προστίθεται στο μείγμα αντίδρασης ένα ένζυμο που ονομάζεται DNase I, το οποίο χρησιμοποιείται συνήθως για την αποικοδόμηση του μολυσματικού DNA. Ενώ η DNase I είναι αποτελεσματική έναντι του ελεύθερου DNA-εκμαγείου, πολλαπλές μελέτες, συμπεριλαμβανομένης της εργασίας των ίδιων των επιστημόνων της BioNTech, δείχνουν ότι η DNase I είναι αναποτελεσματική στην απομάκρυνση του DNA που συνδέεται με το RNA (υβρίδια RNA-DNA).
Αυτός ο περιορισμός δεν είναι αμφιλεγόμενος. Έχει τεκμηριωθεί στη βιβλιογραφία.
Τι έχουν δείξει ανεξάρτητες αναλύσεις
Αυτό το πλαίσιο είναι κρίσιμο για την ερμηνεία πρόσφατων ανεξάρτητων αναλύσεων τελικών φιαλιδίων εμβολίων.
Ερευνητές3 και ρυθμιστικές αρχές4 έχουν αναφέρει την ανίχνευση μολυσματικών ουσιών DNA ουσιαστικά σε κάθε φιαλίδιο που εξετάστηκε. Αυτές οι μολυσματικές ουσίες περιλάμβαναν τόσο δίκλωνο DNA όσο και υβρίδια RNA-DNA που φάνηκαν ανθεκτικά στην πέψη με DNase I.
Σε ορισμένα δείγματα, το DNA που κωδικοποιεί ακίδες υπήρχε σε επίπεδα πάνω από 100 φορές υψηλότερα από άλλες αλληλουχίες πλασμιδίων5, γεγονός που υποδηλώνει ανομοιόμορφη ή ατελή πέψη. Η αλληλούχιση και οι ποσοτικές αναλύσεις PCR ανίχνευσαν περαιτέρω θραύσματα DNA με μέσο μήκος ~200 ζεύγη βάσεων, με ορισμένα να ξεπερνούν τις 4 κιλοβάσεις. Σε αρκετές περιπτώσεις, παρατηρήθηκαν αλληλουχίες που εκτείνονται σχεδόν σε ολόκληρο το πλασμίδιο.
Συνολικά, αυτά τα ευρήματα εγείρουν σοβαρά ερωτήματα σχετικά με τη συνέπεια και την πληρότητα του καθαρισμού κατά τη διάρκεια της μεγάλης κλίμακας παραγωγής, καθώς και σχετικά με τις πιθανές βιολογικές συνέπειες των υπολειμματικών νουκλεϊκών οξέων στους ανθρώπους.
Γιατί οι μολυσματικοί παράγοντες νουκλεϊκών οξέων έχουν βιολογική σημασία
Το RNA και το DNA είναι ισχυροί ενεργοποιητές των έμφυτων ανοσολογικών οδών. Αυτό δεν αποτελεί εικασία. Οι υποδοχείς αναγνώρισης προτύπων και η οδός cGAS-STING αντιδρούν έντονα σε ξένα νουκλεϊκά οξέα, πυροδοτώντας φλεγμονή, αναστολή ανάπτυξης, ακόμη και κυτταρικό θάνατο.
Αυτοί οι μηχανισμοί είναι ακριβώς ο λόγος για τον οποίο τα προϊόντα γονιδιακής θεραπείας υπόκεινται σε αυστηρή εποπτεία ασφαλείας.
Κατά ειρωνικό τρόπο, τα εμβόλια mRNA κατά της Covid σχεδιάστηκαν με τροποποιήσεις ειδικά για τη μείωση αυτής της ισχυρής έμφυτης ανοσολογικής ενεργοποίησης. Ωστόσο, τα υβρίδια RNA-DNA και τα θραύσματα DNA θα εξακολουθούν να προκαλούν ισχυρές ανοσολογικές αποκρίσεις παρά αυτές τις τροποποιήσεις.
Η επιμονή εγείρει νέα ερωτήματα
Υπάρχουν πλέον ουσιαστικά στοιχεία που δείχνουν ότι το spike mRNA και η πρωτεΐνη παραμένουν στους ανθρώπινους ιστούς για εβδομάδες, μήνες, ακόμη και χρόνια μετά τον εμβολιασμό (Πίνακας 1).
Δεν γνωρίζουμε ακόμη εάν αυτή η επιμονή αντανακλά παρατεταμένη σταθερότητα του mRNA, συνεχιζόμενη μετάφραση ή μηχανισμούς που βασίζονται στο DNA. Ωστόσο, δεδομένης της πιθανοφάνειας της ενσωμάτωσης του DNA και του μακροβιότερου μη ενσωματωμένου πλασμιδιακού DNA στα μυϊκά κύτταρα,6 Δεν είναι παράλογο να υποθέσουμε ότι η επιμονή του mRNA, της πρωτεΐνης και των αντισωμάτων του Spike έναντι του Spike χρόνια μετά τον εμβολιασμό δεν είναι άσχετη με τις ακαθαρσίες και τα υποπροϊόντα του DNA μετά την ενδοφλέβια θρόμβωση.
Πίνακας 1. MRNA αιχμής και παραμονή πρωτεΐνης μετά τον εμβολιασμό σε ανθρώπους
Βραχυπρόθεσμες και μακροπρόθεσμες επιπτώσεις στην ασφάλεια
Συνολικά, αυτά τα δεδομένα εγείρουν αρκετά σημαντικά ζητήματα ασφάλειας.
Καταρχάς, έχουν αναφερθεί οξείες ανοσολογικές αντιδράσεις, συμπεριλαμβανομένων των καταιγίδων κυτοκινών και της αναφυλαξίας, αμέσως μετά τον εμβολιασμό. Τέτοιες ισχυρές φλεγμονώδεις αντιδράσεις δεν θα πρέπει να απορρίπτονται εντελώς ως άσχετες με ακαθαρσίες, ιδίως δεδομένων των όσων είναι γνωστά για την ανοσοποιητική ενεργοποίηση που προκαλείται από νουκλεϊκά οξέα.
Δεύτερον, και πιο κρίσιμο, είναι οι μακροπρόθεσμοι κίνδυνοι. Η επίμονη αιχμή έκφρασης θα μπορούσε εύλογα να συμβάλει σε χρόνια ανοσολογικά σύνδρομα. Ακόμα πιο ανησυχητική είναι η πιθανότητα ενσωμάτωσης του DNA, η οποία ενέχει κινδύνους μεταλλαξιογένεσης εισαγωγής ή διαταραχής γονιδίων. Αυτό σημαίνει κίνδυνο για καρκίνο ή αναπτυξιακά ελαττώματα ανάλογα με το πού και σε ποια ηλικία ενσωματώθηκε το DNA.
Αξίζει να σημειωθεί ότι ο ίδιος ο FDA δηλώνει στα ενημερωτικά του δελτία ότι αυτά τα εμβόλια δεν έχουν έχουν αξιολογηθεί για καρκινογένεση (σχηματισμός καρκίνου) ή γονοτοξικότητα (βλάβη του DNA), ένα σημείο που θα ήταν ρουτίνα και αναμενόμενο στην εποπτεία της γονιδιακής θεραπείας, όπου η μακροπρόθεσμη παρακολούθηση είναι στάνταρ.
Το ρυθμιστικό κενό γύρω από το DNA στα εμβόλια mRNA
Δεδομένου ότι δεν υπάρχει πλέον καμία αμφιβολία ότι υπάρχει υπολειμματικό DNA στα εμβόλια mRNA, το ζήτημα είναι εάν οι τρέχουσες οδηγίες και τα όρια ασφαλείας είναι κατάλληλα για τα εμβόλια mRNA. Μας έχουν διαβεβαιώσει ότι τα υποπροϊόντα DNA βρίσκονται εντός των ορίων που ορίζονται στις κανονιστικές οδηγίες. Ποιες είναι λοιπόν οι οδηγίες του FDA σχετικά με τα υποπροϊόντα DNA και τους ρύπους;
Η πιο συχνά αναφερόμενη οδηγία του FDA σχετικά με το υπολειμματικό DNA (≤10 ng ανά δόση) αναπτύχθηκε για ιικά εμβόλια που παράγονται σε ζωντανά κύτταρα που είναι κατακερματισμένα και «γυμνά», με περιορισμένη ικανότητα εισόδου στα ανθρώπινα κύτταρα. Ωστόσο, τα εμβόλια mRNA δεν παράγονται σε κύτταρα, το υπολειμματικό DNA τους δεν προέρχεται από τα κύτταρα ξενιστές και, το πιο σημαντικό, το DNA στα εμβόλια mRNA δεν είναι γυμνό. Σχετίζεται με συστήματα χορήγησης LNP, τα οποία διευκολύνουν ιδιαίτερα την είσοδο του DNA στα κύτταρα. Η οδηγία του FDA του 2010 είναι σαφής ότι δεν καθορίζει σχετικό όριο ασφαλείας για το DNA που σχετίζεται με προϊόντα με βάση LNP.
Η άλλη συχνά αναφερόμενη καθοδήγηση προέρχεται από τον ΠΟΥ για θεραπευτικές αγωγές ανασυνδυασμένων πρωτεϊνών που αντιμετωπίζουν το υπολειμματικό DNA σε προϊόντα όπως μονοκλωνικά αντισώματα ή ορμόνες που παράγονται σε τροποποιημένα κύτταρα. Και εδώ, το υπολειμματικό DNA προέρχεται από κύτταρα ξενιστές ή πλασμίδια έκφρασης, υπάρχει ως ίχνος, μη ενθυλακωμένο DNA (γυμνό) και το τελικό προϊόν είναι μια καθαρισμένη πρωτεΐνη, όχι μια θεραπεία που βασίζεται σε νουκλεϊκό οξύ (εμβόλιο mRNA). Επομένως, αυτή η καθοδήγηση δεν ισχύει για εμβόλια mRNA.
Ούτε τα κανονιστικά πρότυπα του FDA ούτε του ΠΟΥ που αναφέρονται συχνότερα για το υπολειμματικό DNA ήταν που αναπτύχθηκαν για εμβόλια mRNA και δεν αντιμετωπίζουν άμεσα αυτό το ζήτημα ασφάλειας.
Τι είπε ο ΠΟΥ για τα εμβόλια mRNA — Μετά την ανάπτυξη
Το 2022, ο Παγκόσμιος Οργανισμός Υγείας εξέδωσε οδηγίες που αφορούσαν ειδικά τα εμβόλια mRNA.7. Αξίζει να σημειωθεί ότι αυτό το έγγραφο δημοσιεύθηκε μετά την παγκόσμια κυκλοφορία αυτών των προϊόντων. Αναφέρει συγκεκριμένα ότι οι παρούσες οδηγίες απάντησαν σε: «τα ζητήματα ασφάλειας, παραγωγής και κανονισμών που σχετίζονται με αυτήν τη νέα τεχνολογία.Το έγγραφο κάνει επίσης αρκετές σημαντικές δηλώσεις:
"Επειδή δεν υπάρχουν ακόμη διαθέσιμες λεπτομερείς πληροφορίες σχετικά με τις μεθόδους που χρησιμοποιούνται για την παραγωγή, οι έλεγχοι δεν έχουν ακόμη τυποποιηθεί για ασφαλή και αποτελεσματικά εμβόλια mRNA και ορισμένες λεπτομέρειες παραμένουν ιδιόκτητες και επομένως μη διαθέσιμες στο κοινό, δεν είναι εφικτό να αναπτυχθούν συγκεκριμένες διεθνείς οδηγίες ή συστάσεις προς το παρόν."
Αναφέρει περαιτέρω: «Οι λεπτομερείς διαδικασίες παραγωγής και ελέγχου... θα πρέπει να συζητηθούν και να εγκριθούν από την NRA [Εθνική Ρυθμιστική Αρχή].] σε ατομική βάση για κάθε περίπτωση ξεχωριστά."
Ο ΠΟΥ αναγνωρίζει ότι οι έλεγχοι για τα εμβόλια mRNA δεν είχαν ακόμη τυποποιηθεί και ότι δεν ήταν εφικτό να θεσπιστούν συγκεκριμένες διεθνείς κατευθυντήριες γραμμές ή συστάσεις. Επιπλέον, απαιτείται κανονιστική εποπτεία για την αξιολόγηση κατά περίπτωση από τις εθνικές αρχές.
Αυτό δηλώθηκε μετά την ανάπτυξη των εμβολίων mRNA..
Και κατά τη σύνταξη αυτού του Υποσυστήματος, ο FDA δεν έχει ακόμη θεσπίσει τυποποιημένες οδηγίες για τα εμβόλια mRNA και δεν έχει παράσχει οποιαδήποτε αποδεικτικά στοιχεία και δεδομένα βασισμένα στην ασφάλεια που να υποστηρίζουν τυχόν όρια DNA στα εμβόλια mRNA.
Τέλος, αξίζει να επαναληφθεί: ενώ η τεχνολογία mRNA δεν είναι καινούργια, πριν από την Covid, ρυθμιζόταν ως γονιδιακή θεραπεία, όχι ως παραδοσιακό εμβόλιο. Τα ζητήματα ασφάλειας που αφορούν τα υποπροϊόντα DNA στα εμβόλια Covid θα είναι τα ίδια με οποιοδήποτε εμβόλιο mRNA, συμπεριλαμβανομένων εκείνων για τη γρίπη, τον RSV ή ακόμα και τα εμβόλια mRNA για τον καρκίνο.
Αυτό συμβαίνει επειδή τα προϊόντα mRNA είναι θεμελιωδώς διαφορετικά. Πρέπει να εισέλθουν στα κύτταρα και να τα καθοδηγήσουν να παράγουν μια ξένη πρωτεΐνη. Αυτό δεν μοιάζει με κανένα άλλο συμβατικό εμβόλιο που χορηγεί την πρωτεΐνη απευθείας. Δεν υπάρχει κλινικό προηγούμενο για αυτήν την πλατφόρμα και δεν υπάρχει κλινικό προηγούμενο για επαναλαμβανόμενη δοσολογία. Και σίγουρα δεν υπάρχει προηγούμενο σε πληθυσμιακή κλίμακα.
Σε αυτό το στάδιο, χωρίς πανδημία, με τη συσσώρευση μηχανιστικών δεδομένων και κλινικών παρατηρήσεων, και τον πολλαπλασιασμό των προϊόντων εμβολίων mRNA που κυκλοφορούν στην αγορά, χρειαζόμαστε διαφάνεια και άμεση συμμετοχή σε σοβαρές μελέτες ασφάλειας από τις ρυθμιστικές αρχές, ιδίως από τον FDA, ο οποίος θεσπίζει κρίσιμες κατευθυντήριες γραμμές για την παρασκευή αυτών των προϊόντων - ειδικά όσον αφορά τα υποπροϊόντα DNA.
Η καινοτόμος τεχνολογία απαιτεί καινοτόμο έλεγχο – όχι σιωπή, εκβιασμό ή λογοκρισία.
Αναφορές
1 https://www.frontiersin.org/journals/molecular-biosciences/articles/10.3389/fmolb.2024.1426129/full
2 Webb C, Ip S, et al Mol Pharm. 4 Απριλίου 2022;19(4):1047-1058. doi: 10.1021/
3 https://www.tandfonline.com/doi/10.1080/08916934.2025.2551517?url_ver=Z39.88-2003&rfr_id=ori:rid:crossref.org&rfr_dat=cr_pub%20%200pubmed
4 https://www.tga.gov.au/resources/publication/tga-laboratory-testing-reports/summary-report-residual-dna-and-endotoxin-covid-19-mrna-vaccines-conducted-tga-laboratories.
5 https://zenodo.org/records/17832183; https://www.scstatehouse.gov/CommitteeInfo/SenateMedicalAffairsCommittee/PandemicPreparedness/Phillip-Buckhaults-SC-Senate-09122023-final.pdf
6 Wang et al. (2004) – «Ανίχνευση ενσωμάτωσης πλασμιδιακού DNA στο γονιδιωματικό DNA του ξενιστή μετά από ενδομυϊκή ένεση και ηλεκτροδιάτρηση» (Gene Therapy, 2004). Σε ποντίκια, γυμνό πλασμιδιακό DNA εγχύθηκε ενδομυϊκά, ακολουθούμενο από ηλεκτροδιάτρηση για την ενίσχυση της πρόσληψης. Χρησιμοποιώντας μια εξαιρετικά ευαίσθητη PCR σε καθαρισμένο γονιδιωματικό DNA (με διαχωρισμό σε πήκτωμα για την απομάκρυνση εξωχρωμοσωμικών μορφών), οι συγγραφείς εντόπισαν τέσσερα ανεξάρτητα συμβάντα ενσωμάτωσης 4 εβδομάδες μετά την ένεση. Η αλληλούχιση σύνδεσης επιβεβαίωσε τυχαίες θέσεις ενσωμάτωσης (χωρίς προτιμησιακά θερμά σημεία), σύμφωνα με μη ομόλογη ένωση άκρων. Η συχνότητα ενσωμάτωσης ήταν χαμηλή αλλά μετρήσιμη. Αυτή είναι μια από τις πιο σαφείς επιδείξεις πραγματικών αυθόρμητων συμβάντων ενσωμάτωσης in vivo για γυμνό πλασμιδιακό DNA σε μυς. Αξίζει να σημειωθεί ότι αυτή η μελέτη χρησιμοποίησε ενισχυμένη χορήγηση DNA μέσω ηλεκτροδιάτρησης, η οποία θα μπορούσε κανείς να συγκρίνει με την ενισχυμένη χορήγηση μέσω LNPs.
Martin et al. (1999) – «Πλασμιδιακό DNA Εμβόλιο κατά της Ελονοσίας: Η Δυνατότητα για Γονιδιωματική Ολοκλήρωση μετά από Ενδομυϊκή Έγχυση» (Ανθρώπινη Γονιδιακή Θεραπεία). Αυτή η προηγούμενη μελέτη εξέτασε το πλασμιδιακό DNA IM σε ποντίκια και χρησιμοποίησε υβριδισμό Southern blot και PCR σε γονιδιωματικό DNA υψηλού μοριακού βάρους για να διερευνήσει την ενσωμάτωση. Ενώ η επιμονή ήταν ως επί το πλείστον εξωχρωμοσωμική, ανέφεραν στοιχεία που υποδηλώνουν σπάνια ενσωμάτωση σε ορισμένα δείγματα (αν και δεν αλληλουχήθηκαν τόσο οριστικά όσο οι μεταγενέστερες εργασίες). Έθεσε ένα σημείο αναφοράς για χαμηλό κίνδυνο, αλλά αναγνώρισε την πιθανότητα εμφάνισης συμβάντων πολύ χαμηλής συχνότητας, επηρεάζοντας τις επακόλουθες οδηγίες του FDA για τα εμβόλια DNA.
Ledwith et al. (2000) – «Εμβόλια πλασμιδιακού DNA: Διερεύνηση της ενσωμάτωσης στο κυτταρικό DNA του ξενιστή μετά από ενδομυϊκή ένεση σε ποντίκια» (Intervirology). Γυμνό πλασμιδιακό DNA που εγχύθηκε ενδομυϊκά σε ποντίκια έδειξε ότι και ενώ δεν παρατηρήθηκε ανιχνεύσιμη ενσωμάτωση, DNA εξακολουθούσε να ανιχνεύεται στον τετρακέφαλο μυ έως και 26 εβδομάδες. Το DNA ήταν εξωχρωμοσωμικό.
7 Επιτροπή Εμπειρογνωμόνων του ΠΟΥ για τη Βιολογική Τυποποίηση 74η Έκθεση Παράρτημα 3. Αξιολόγηση της ποιότητας, της ασφάλειας και της αποτελεσματικότητας των εμβολίων αγγελιοφόρου RNA για την πρόληψη λοιμωδών νοσημάτων: κανονιστικές σκέψεις https://cdn.who.int/media/docs/default-source/biologicals/vaccine-standardization/annex-3—mrna-vaccines_who_trs_1039_web-2.pdf
-
Η Δρ. Σαρλότ Κούπερβασερ είναι διακεκριμένη καθηγήτρια στο Τμήμα Αναπτυξιακής, Μοριακής και Χημικής Βιολογίας στην Ιατρική Σχολή του Πανεπιστημίου Tufts και Διευθύντρια του Εργαστηρίου Σύγκλισης Tufts στο Tufts. Η Δρ. Κούπερβασερ είναι διεθνώς αναγνωρισμένη για την εμπειρία της στη βιολογία του μαστικού αδένα και στον καρκίνο του μαστού, καθώς και στην πρόληψή του. Είναι μέλος της Συμβουλευτικής Επιτροπής για τις Πρακτικές Εμβολιασμού.
Προβολή όλων των μηνυμάτων
